康寧Matrigel基質(zhì) corning基質(zhì)膠現(xiàn)貨供應(yīng)，歡迎聯(lián)系華雅思創(chuàng)生物咨詢購買

在體內(nèi)，基底膜是以細(xì)胞為基礎(chǔ)的薄層細(xì)胞外基質(zhì)。康寧 Matrigel matrix 是從富含胞外基質(zhì)蛋白的 EHS 小鼠腫瘤中提取的基底膜基質(zhì)，其中含有約 60%層粘連蛋白、30% IV 膠原和 8%的巢蛋白。康寧 Matrigel matrix 還含有基底膜聚糖、TGF-?、表皮生長(zhǎng)因子、類胰島素生長(zhǎng)因子、組織纖溶酶原及其他生長(zhǎng)因子。

包被涂層方法：

  康寧基底膜基質(zhì)可以以幾種方式使用。薄層凝膠法適用于在凝膠頂部接種細(xì)胞，厚層凝膠法允許您在三位基質(zhì)內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞，薄層包被法(不凝膠化)給您提供了復(fù)雜的蛋白質(zhì)層，您可以在其上培養(yǎng)細(xì)胞。您的選擇基于您想要實(shí)現(xiàn)的最終結(jié)果，無論是細(xì)胞生長(zhǎng)、附著還是分化。

  注意：在康寧支持網(wǎng)頁上發(fā)布了具體的應(yīng)用程序*。康寧基底膜基質(zhì)產(chǎn)品的蛋白質(zhì)濃度是批次特異的并提供在分析證明書上。通過計(jì)算需要的特定蛋白濃度(mg/mL)獲得了稀釋康寧基底膜基質(zhì)產(chǎn)品的一致結(jié)果。為了維持凝膠化的一致性，我們推薦不要將康寧基底膜基質(zhì)稀釋到少于 3 mg/mL。請(qǐng)使用冰冷的無血清培養(yǎng)基來稀釋康寧基底膜基質(zhì)。通過在冰上移液管上下吸液或渦旋小瓶來混合。

薄層凝膠法
  1. 依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì)。使用預(yù)冷的移液管，將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻。
  2. 將培養(yǎng)板放置在冰上，以 50 μl/cm2向生長(zhǎng)表面加入康寧基底膜基質(zhì)。
  3. 將培養(yǎng)板放置在 37 °C ，30 分鐘。
  4. 如果有必要的話，請(qǐng)?jiān)谑褂脽o血清培養(yǎng)基輕柔漂洗前吸出未結(jié)合的材料。請(qǐng)確保移液器的吸頭不要刮擦包被的表面。培養(yǎng)板現(xiàn)在可以使用了。

厚層凝膠法
  1.  依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì)。使用預(yù)冷的移液管，將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻。
  2. 將培養(yǎng)板放置在冰上。向康寧基底膜基質(zhì)中加入細(xì)胞并使用預(yù)冷的移液管懸浮。以150-200 μl/cm2向生長(zhǎng)表面加入康寧基底膜基質(zhì)。
  3. 將培養(yǎng)板放置在 37°C，30 分鐘。現(xiàn)在可以添加培養(yǎng)基了。細(xì)胞也可以培養(yǎng)在這一凝膠的頂部。

薄層包被法
  1. 依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì)。使用預(yù)冷的移液管，將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻。
  2. 使用無血清培養(yǎng)基將康寧基底膜基質(zhì)稀釋到需要的濃度。對(duì)于您的應(yīng)用程序，您應(yīng)該完成以經(jīng)驗(yàn)為主的研究來確定您的最·適包被濃度。
  3. 向被包被的容器中加入稀釋的康寧基底膜基質(zhì)。加入的量應(yīng)該足以容易地覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面。在室溫下培養(yǎng) 1 個(gè)小時(shí)。
  4. 吸出未結(jié)合的材料并使用無血清培養(yǎng)基輕柔地漂洗。培養(yǎng)板現(xiàn)在可以使用了。

細(xì)胞復(fù)蘇：
  康寧中·性蛋白酶(貨號(hào) 354235)，康寧細(xì)胞復(fù)蘇溶液(貨號(hào) 354253)。使用康寧細(xì)胞復(fù)蘇溶液在冰上 7 小時(shí)內(nèi)解聚康寧基底膜基質(zhì)能夠?qū)崿F(xiàn)將生長(zhǎng)在康寧基底膜基質(zhì)上的細(xì)胞最·有效地復(fù)蘇，或者使用中·性蛋白酶，考慮到連續(xù)培養(yǎng)，中·性蛋白酶作為一種金屬酶可以分散細(xì)胞。

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應(yīng)用

康寧Matrigel基質(zhì)可有效促進(jìn)正常和轉(zhuǎn)化的貼壁依賴性上皮細(xì)胞以及其他類型細(xì)胞的粘附和分化，包括神經(jīng)元、支持細(xì)胞、雞晶狀體、血管內(nèi)皮細(xì)胞以及肝細(xì)胞。

應(yīng)用領(lǐng)域包括：

影響成年大鼠肝細(xì)胞基因表達(dá)

小鼠和人乳腺上皮細(xì)胞3D培養(yǎng)

體內(nèi)外周神經(jīng)再生

代謝和毒理學(xué)研究

某些腫瘤細(xì)胞侵襲試驗(yàn)的開發(fā)

體外和體內(nèi)血管生成研究

人類腫瘤在免疫抑制小鼠體內(nèi)擴(kuò)增

人胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞 (hiPSc) 的維持

hiPS細(xì)胞的神經(jīng)元分化 

Matrigel基質(zhì)質(zhì)量控制規(guī)范

通過小鼠抗體產(chǎn)物 (MAP) 檢測(cè)進(jìn)行常規(guī)小鼠菌落病原體篩選

不含LDEV的EHS腫瘤

對(duì)包括LDEV在內(nèi)的多種病原體進(jìn)行廣泛的PCR檢測(cè)，確保對(duì)生產(chǎn)過程中使用的原材料進(jìn)行嚴(yán)格控制

經(jīng)過檢測(cè)，未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌、真菌和支原體

通過Lowry方法測(cè)定蛋白濃度

通過鱟阿米巴樣細(xì)胞溶解物試驗(yàn)測(cè)定內(nèi)毒素水平

在37°C下進(jìn)行14天凝膠穩(wěn)定性測(cè)試

利用神經(jīng)軸突生長(zhǎng)試驗(yàn)測(cè)定各批次的生物活性；將雞背根神經(jīng)節(jié)接種到1.0 mm厚的康寧Matrigel基質(zhì)上，48小時(shí)后，在未添加神經(jīng)生長(zhǎng)因子的情況下，神經(jīng)軸突生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)需呈陽性反應(yīng)